各位实验猿在使用三重四极杆质谱联用仪时,做MRM检测偶尔会遇到出峰峰面积或峰高重现性差的问题。在排查了硬件部分如液相自动进样器,MS喷针或者DL管后依旧找不出问题,崩溃到简直要怀疑人生了……
造成这个原因,可能是:Loop time 的设置!
什么是Loop time(循环时间)?
首先我们先了解一下概念,或许下面这张图能有帮助。
我们知道一个峰是由若干个采集点描绘而成的,简单来说Loop time就是从一个采集点开始采集到下一个点开始采集完成一次循环的时间(各个事件的时间总和)。
到底如何设定Loop time?
首先:我们得知道测定一个质谱需要20个点,所以我们应将循环时间设置为接近峰宽的1/20,比如:峰宽0.1min,设置循环时间为0.3sec。
如循环时间过长:则采集时间(Dwell time)变长导致采集点数不够,峰形变差从而影响重现性。
如循环时间过短:则采集时间(Dwell time)变短导致采集精度不够或不稳定,影响灵敏度和重现性。
由此可知,Loop time的设置关键就是我们既要保证采集点数足够,也要保证Dwell time时间足够。
Dwell time对灵敏度到底有何影响?另外多说一句,如果测定化合物过多导致分配的Dwell time不够的话我们可以根据保留时间分段进行采集哦。
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