共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)是现代细胞生物医学分析仪器之一。目前,激光共聚焦显微镜已被用于细胞形态定位,立体结构重组,动态过程等,并提供实用的研究方法。
如定量荧光测量和定量图像分析,结合其他相关的生物技术,形态,它广泛应用于分子生物学领域,如生理学,免疫学和遗传学。
一、长期观察细胞迁移和生长
活细胞观察通常需要一定的加热装置和灌注室以保持培养液的适当温度和二氧化碳浓度恒定。目前的激光共聚焦显微镜大大提高了光子发生效率。
并结合更亮的物镜和更少的光毒性染料,可以减少每次扫描对激光束对细胞的损害,并使用数小时。时间过程定时扫描记录细胞生物现象,如细胞迁移和生长。
二、应用于细胞和分子生物学的基础研究
激光共聚焦显微镜使用照明针和检测孔的共轭成像,有效抑制离焦模糊成像,可以分别对样品层进行成像,并且“光学切片”功能不会损坏活细胞也称为图像。
对于“微CT”。 CLSM还可以定位,表征,量化和分析贴壁个体细胞或细胞群的实时,细胞内,细胞外荧光,以及细胞内成分,如线粒体,内质网,高尔基体,DNA,RNA,Ca2 +,分布和含量。动态观察和观察Mg2 +,Na +等,对细胞结构和功能的研究达到分子水平。
三、应用于筛选肿瘤和抗癌药物
普通显微镜和电子显微镜只能定性分析肿瘤相关抗原,而激光共聚焦显微镜可以对单标记或多标记细胞,组织标本和活细胞进行可重复的荧光定量分析,以表达肿瘤细胞的抗原 ,细胞结构特征,抗肿瘤药物的作用和机制进行了量化。
四、在血液学和医学免疫学研究中的应用
免疫细胞和系统的激光共聚焦显微镜,如树突细胞,单核吞噬细胞系统,自然杀伤细胞,淋巴细胞,有效识别免疫细胞的性质,同时准确定位细胞。
五、在大脑和神经科学中的应用
激光共聚焦显微镜的分层扫描显示轴突的内部结构是一致的。激光共聚焦显微镜可以观察脑干组织轴突的正常方向,可以消除荧光显微镜引起的一些病理伪影。激光共聚焦显微镜可以观察到轴突的三维结构,因此可以观察到在普通光学显微镜下无法发现的神经组织的微小病变。
六、在眼科研究中的应用
激光共聚焦显微镜可观察到晶状体,角膜,视网膜,虹膜和睫状体的结构和病理变化。
七、骨科研究领域的应用
激光共聚焦显微镜在整形外科研究中的应用表明,CLSM在观察骨细胞形态,骨细胞特异性蛋白(骨钙蛋白)和骨细胞相互作用方面具有显着优势。
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