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百贺公司简述激光共聚焦显微镜的应用以及原理

提供 来源:      日期:2019年11月20日
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激光共聚焦显微镜配有基于荧光显微镜成像的激光扫描装置,图像处理由计算机完成,光学成像分辨率提高了30%-40%。荧光探针被紫外线或可见光激发,获得细胞或组织内部精细结构的荧光图像,并在亚细胞水平观察到诸如Ca2 +,pH,膜电位和细胞形态变化等生理信号。

 

它已成为形态学,分子生物学,神经科学,药理学和遗传学领域的新一代强大的研究工具。激光共聚焦成像系统可用于观察各种染色,未染色和荧光标记的组织和细胞,观察组织切片和细胞的生长和发育特征,并研究细胞内转运和能量转换。

 

激光共聚焦显微镜能够在活细胞中进行离子和pH变化研究(RATIO),神经递质研究,涉及荧光的差分干扫描,多次荧光层析成像和重叠。荧光指示剂的荧光光谱分析,用于定量分析荧光样品的延时扫描以及分析细胞的动态结构成分和三维动态结构成员,荧光共振能量转移。

 

荧光原位杂交(FISH),细胞骨架研究,基因作图研究,原位实时PCR产物分析,荧光漂白回收研究(FRAP),细胞间通讯研究,蛋白间研究,膜电位和膜流动性研究已经完成了图像分析和3D重建的分析。

 

常规的光学显微镜使用场源,并且样品上每个点的图像都会受到来自相邻点的衍射或散射光的干扰。激光共聚焦显微镜使用激光束通过照明针孔形成点光源,以扫描样本中焦平面的每个点以及样本上的照明点。

 

成像是在探针针孔处执行的,该探针针孔后面的点倍增管(PMT)或冷耦合设备(cCCD)逐点或逐行接收探针,在计算机监视器屏幕上迅速形成荧光图像。照明针孔和检测针孔相对于物镜的焦平面是共轭的。

 

并且焦平面上的点同时聚焦在照明针孔和发射针孔上,并且焦平面之外的点不在成像时成像。探针针孔由此获得的共焦图像是样本的光学截面,它克服了普通显微镜图像模糊的缺点。

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