激光激光共聚焦显微镜是一套以激光为光源的观察，分析和输出系统，在传统光学显微镜的基础上采用共轭聚焦原理和装置，并利用计算机对其进行数字图像处理，观察，使用紫外或可见光激发荧光探针，将光学成像的分辨率提高30％至40％，从而获得细胞或组织内的精细结构的荧光图像，并观察亚细胞水平的生理信号和细胞形态的变化。在形态学，分子生物学，神经科学，药理学，遗传学等领域的新一代研究工具。

一、激光激光共聚焦显微镜原理

基本上，激光共焦显微镜是一种现代光学显微镜，它对普通光学显微镜进行了以下技术改进：

⒈利用点扫描技术将样品分解为​​二维或三维空间中的无数点，用非常小的激光束（点光源）逐行扫描图像，然后合成整体平面或三维通过微单元的图像。 传统的光学显微镜下次在场光源中成像，样品上每个点的图像将受到衍射光和相邻点的散射光的干扰。这两幅图像的清晰度和精度是无与伦比的。

⒉使用计算机收集和处理光信号，并使用光电倍增管放大信号图。

⒊使用激光作为光源由于激光的单色性非常好，源光束的波长是相同的，从根本上消除了色差。

⒋共聚焦技术用于在物镜焦平面上放置一个带有小孔的挡板，以阻挡焦平面外的杂散光，消除球面像差;并进一步消除色差。

在激光共聚焦显微镜中，计算机取代人眼或相机进行观察和成像，并且所获得的图像是数字的，可以在计算机中处理以进一步改善图像的清晰度。

而且，通过使用光电倍增管，可以放大非常微弱的信号，并且灵敏度大大提高。由于上述技术的综合利用。可以说LSCM是显微技术，光电技术和计算机技术的完美结合，是现代技术发展的必然产物。

二、生物医学研究中的激光共聚焦显微镜的应用

目前，装备精良的LSCM完全能够替代过去的任何光学显微镜。它相当于各种制作精良的普通光学显微镜的有机组合，如倒置光学显微镜，紫外显微镜，荧光显微镜和暗色。

因此，野外显微镜，相差显微镜（PH），微分干涉对比显微镜（DIC）等被称为通用显微镜，并且由其获得的精细图像可以使其他显微镜图像较差。

⒈生化成分和特殊分子探针的精确定位不仅可以定位待检测组分的细胞。

⒉观察活细胞和活组织LSCM，观察和测量活组织和活细胞，不损伤细胞，不仅省去了繁琐的预处理过程（如脱水，脱蜡，染色等）;此外，观察到的样品可以继续用于其他研究。该功能对细胞培养和转基因研究尤为重要。这可以说是LSCM的最大优势。

⒊定量测量首先，使用特定的荧光探针染色样品。样品的荧光强度与测量组分的含量成比例。如果剩余条件是固定的，则通过比较样品之间的荧光强度值，可以得出结论。特定成分的含量比例。

⒋动态观察在同一样品平面上，随着时间的推移连续扫描可以分析细胞结构，包含和标记的动态变化。该领域最新的实践是使用LSCM观察心肌或平滑肌细胞中游离钙，钠，钾离子浓度或pH的动态变化。

⒌数据和图像的数字化取代了普通相机和计算机。获得的图像是数字的，可以及时输出或长时间存储，并且可以进一步处理。