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激光共聚焦显微镜的组成

提供 来源:      日期:2019年05月15日
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激光共焦显微镜是20世纪80年代诞生的新一代显微镜,随着光学,视频,计算机和其他技术的迅速发展。 基于传统的光学显微镜,使用单光子激光器作为光源。利用共同焦点的原理和装置,计算机用于观察,分析和输出被观察物体的数字图像处理。

 

 

激光共聚焦显微镜可以对样品进行扫描和成像,以获得高分辨率的薄层光学部分。观察并分析细胞的三维结构,得到多维成像结果。或完成样品的长期延迟序列成像。 LSCM已成为形态学,分子细胞生物学,神经科学和药理学领域的强大研究工具。

 

基于多年来在该装置大型仪器共享平台上维护激光共聚焦显微镜的经验,接下来为您阐述激光共聚焦显微镜的组成都有哪些。

 

一、激光光源

 

包括四个覆盖可见波长范围的独立激光器(提供6种不同波长)。

 

⑴近紫外激光:405nm,25mW,适用于DAPI,Hochest等染料和FRAP等光刺激实验。

 

⑵多线氩离子激光器:458nm,488nm,515nm,30mW,适用于FITC,GFP,YFP,ALEX488等染料。

 

⑶绿色激光:559nm,15mW,适用于PI,Texas等多种染料; (4)红色激光:635nm,20mW,适用于CY5,CY5.5等染料。

 

AOTF型激光积分器用于组合每个激光器的激光器,并通过光纤将它们传输到扫描装置,使不同的激光器作为一个整体工作。根据需要控制样品扫描中的激光强度。强度调节范围为0.1%-100%,精确步进0.1%,可在任何区域实现激光强度控制和波长选择。

 

二、扫描单元

 

后扫描单元,光谱共焦荧光检测器,具有三个独立的光电倍增管荧光检测通道,包括两个光谱通道和一个自动彩色滤光片通道。使用光栅分离和狭缝收集,提供CH1和CH2通道的精确光谱扫描。

 

它配备3个荧光通道和1个透射光通道,用于记录差分干涉图像。通过软件控制可以实现各种扫描方法。除了传统的扫描方法,它还支持点扫描,线扫描(直线和任意曲线),矩形扫描,双向扫描,序列扫描,缩放。

 

三、倒置荧光显微镜

 

倒置研究级电动显微镜 -  IX81主机,包括电动平台,6位物镜转台和100%光路转换器。 10×,20×低倍物镜,40×油镜(NA = 0.95),超级色差校正物镜60×油镜(NA = 1.35),100×油镜(NA = 1.4)均有微分干涉拍摄功能。上述物镜可以考虑生物样品的荧光和DIC观察照片。

 

最后的是活细胞恒温培养系统。活细胞培养室配备先进的聚焦抗漂移ZDC和系统适配器,可保持恒定的CO2,温度和湿度,确保培养皿中活细胞的长期延迟序列成像。

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