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百贺公司浅谈激光共聚焦显微镜的工作原理

提供 来源:      日期:2019年09月20日
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激光扫描共焦显微镜(LSCM)是基于荧光显微镜成像的激光光源和扫描装置。在常规光学显微镜的基础上使用共轭聚焦装置,并且计算机用于图像处理以对观察到的样品执行故障。

 

 

扫描和成像是一种高灵敏度和高分辨率的显微镜。它广泛用于生命科学的组织,细胞和分子水平研究。它主要用于定量荧光检测,共焦图像分析和3D图像。重建,分析活细胞动力学参数和细胞间通讯。

 

激光共聚焦显微镜使用激光作为光源。激光器发射的激光通过照明针孔形成点光源。在透镜和分束器形成平行光之后,它通过物镜和样品中焦平面上的每个点聚焦在样品上扫描。

 

激光激发样品后发射光的波长比入射光长,并且可以通过透镜通过分束器重新聚焦到达探针针孔,由后续的光电倍增管检测,并成像显示器以获得所需的荧光。

 

图像而不是聚焦光被探针针孔阻挡,不能通过探针针孔,因此荧光信号不能显示在显示器上。这种双共轭成像方法称为共焦。因为激光被用作光源,所以它被称为“激光共聚焦显微镜”。

 

激光共聚焦显微镜通过逐点扫描样品的X-Y轴形成二维图像。如果在z轴上调整焦平面的位置并且连续扫描不同两个位置的多个二维图像,则可以获得一系列光学切片图像。

 

在相应软件的支持下,通过数字反卷积方法获得清晰的三维重建图像。因为激光共聚焦显微镜可以沿z轴方向获得不同水平的层的光学部分,所以可以获得组织细胞的每个横截面的一系列连续光学部分,以实现细胞“CT”功能。

 

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